討論串[求救] 關於誘導出預料外的蛋白
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推噓1(1推 0噓 2→)留言3則,0人參與, 最新作者boblu (六百)時間18年前 (2007/10/23 00:40), 編輯資訊
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transcription, translation 的中斷以及 protein degradation 都不一定是隨機的喔. 你的 construct 有沒有帶 tag 呢?. 作個免疫染色看看那個 18KD 的鼕鼕是不是你預期的產物的片段吧. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc).

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者mournermind (阿矇)時間18年前 (2007/10/22 23:57), 編輯資訊
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可是degrade的情況不是說蛋白會隨機degrade所以會糊糊的??. 因為我的PAGE跑出來就只有一條18kDa的band很明顯甚至比我要的還明顯. 可是並沒明顯糊糊的狀態ㄝ..... 還是說確定degrade是會這樣沒錯呢.. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From

推噓2(2推 0噓 1→)留言3則,0人參與, 最新作者mournermind (阿矇)時間18年前 (2007/10/22 22:45), 編輯資訊
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我現在已經成功有誘導出我要的蛋白(40kDa) 接在pET30a. 但是在我要的蛋白之外卻有一個表現更多的蛋白(18kDa). 表現量比我要的大. 我曾想過也許是transcription不好所以做到一半蛋白斷掉. 不過後來想一想那應該會smear整個糊掉而不會有規律的斷. 所以否決我的想法了. 不
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