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討論串[問題] 2D 電泳 實驗新手問題
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#5
Re: [問題] 2D 電泳 實驗新手問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (有氣質的台客)時間19年前 (2006/05/06 15:36), 編輯資訊
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※ 引述《lenz.bbs@bbs.wretch.cc (Luo, Yi-Jyun)》之銘言：. 說是這麼說沒錯. 但是我覺得很難用!. 所以雖然我買了這組KIT，但還是用PIERCE的BCA測蛋白質. 至於背景值太高的問題，倒也還好，扣掉Blank即可. --. http://0rz.net/da
#4
Re: [問題] 2D 電泳 實驗新手問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者lenz.時間19年前 (2006/05/06 11:00), 編輯資訊
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※ 引述《aggaci.bbs@ptt.cc (有氣質的台客)》之銘言：. > TCA沉澱後的pellet以rehydration buffer溶2個小時或overnight會幾乎全溶. > 蛋白質定量可以用GE的2D Quant kit測濃度. 沒錯..2D Quant kit 對 urea 的t
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#3
Re: [問題] 2D 電泳 實驗新手問題
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者silverberry (那瞬間我沒有懷疑自己...)時間19年前 (2006/05/02 14:28), 編輯資訊
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我的材料是竹筍的非水溶性蛋白. 用 TCA/Acetone 沉澱. 回溶的時候加 2 uL 的 1N NaOH. 學長是說因為 TCA 是酸 加鹼中和可以提高溶解度. 然後放在 4 度C 中回溶 overnight. 效果還不錯 ^^. --. 寒風中的雪女無助的站著.... 望著對自己捨命相救 卻
#2
Re: [問題] 2D 電泳 實驗新手問題
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者aggaci (有氣質的台客)時間19年前 (2006/05/02 12:23), 編輯資訊
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TCA沉澱後的pellet以rehydration buffer溶2個小時或overnight會幾乎全溶. 蛋白質定量可以用GE的2D Quant kit測濃度. --. http://0rz.net/da0PG 我的相簿..... --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From
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Re: [問題] 2D 電泳 實驗新手問題
推噓1(1推 0噓 1→)留言2則，0人參與, 最新作者maniacmei (       )時間19年前 (2006/05/02 00:52), 編輯資訊
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雖然是很久以前的問題..... 不過最近的實驗遇到相同的瓶頸..... 唯一不同的是使用的來源是CHOA (mammalian cell). 收下細胞後 會先通一個Sepharose 4B column將thiol group protein elute出. 然後再接TCA沉澱. 沉澱完就遇到相同的
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