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討論串[問題] western blotting 的問題
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#5
Re: [問題] western blotting 的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者twoblueskys (人)時間19年前 (2006/08/02 10:16), 編輯資訊
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有可能是developer出問題. 我有一次肉眼看得到但是怎麼壓都壓不出來. 後來問學長姊才知道是developer出問題. 看看你的developer有沒有變黑. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 163.15.174.122.
#4
Re: [問題] western blotting 的問題
推噓0(0推 0噓 1→)留言1則，0人參與, 最新作者Dokken (LYncH-MoD)時間19年前 (2006/07/31 17:07), 編輯資訊
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對不起 講的不太清楚. 我是用要壓beta-catenin PVDF的方向應該也有用對. 後來我自己有在做一次用beta-actin去檢視 (不是同一片membrane 是在跑一次). 發現有染到 beta-actin 所以那beta-catenin沒有. 是不是我用的抗體濃度太低呢 還是有其他問題
#3
Re: [問題] western blotting 的問題
推噓2(2推 0噓 0→)留言2則，0人參與, 最新作者Bluecold (黑特版比就可版好笑)時間19年前 (2006/07/31 01:15), 編輯資訊
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或是說antigen加的太少. 所以antibody會偵測不到. 上次我就遇到這個問題. 我的antibody都已經1:1000了. 居然還要將進0.4 ug才有辦法detect. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 203.73.201.31.
#2
Re: [問題] western blotting 的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (Desperado)時間19年前 (2006/07/30 23:08), 編輯資訊
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你用什麼抗體? 樣品是什麼? 有無positive control?. 壓片壓多久?二抗確定用對嗎?. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.114.100.165.
#1
[問題] western blotting 的問題
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者Dokken (LYncH-MoD)時間19年前 (2006/07/30 22:21), 編輯資訊
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請教版上各位. 我最近2個禮拜來作western出了點問題. 就是每次壓完片後 都一片空白 看不到band. 我用1抗體的濃度是1:1000 而2抗是1:2000. 整個操作大約是. transfer 400mA 3.5hrs (gel上的marker看起來是有過去). blocking 4'C o
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