討論串請問RT-PCR
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者mandible (生化...go go go !!)時間19年前 (2006/10/25 23:44), 編輯資訊
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這樣跑很累... 因為到Qpcr的system許多問題要考慮. 1.primer concentration. 2.primer dimer. 3.cDNA concentration. 4.pcr product molecular weight. 不過..我之前也是花了很多時間再跑traditi

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者anidiot (^__________^)時間19年前 (2006/10/25 12:53), 編輯資訊
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老師是希望在上機之前. 若能跑gel看到差異還有調好condition再去做real time. 不過我今天跑了可以看到band. 接下來應該就會去做real time. 謝謝大家的意見 ^^. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.112.133.163.

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者elgase (夏生桂和)時間19年前 (2006/10/25 11:33), 編輯資訊
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要做semi-qPCR事前要先check很多細節,如果能上real-time PCR會比較單純一點. 我以前的經驗是,如果你RT用的total RNA總量有1ug,actin大概在23個cycle就. 可以在膠上看到band,至於interesting gene的band,那就case by cas

推噓3(3推 0噓 1→)留言4則,0人參與, 最新作者anidiot (^__________^)時間19年前 (2006/10/24 23:33), 編輯資訊
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請問RNA轉成cDNA後. 我想要做semi-qPCR. PCR產物不saturate為前提. 25個cycles跑gel看的到嗎. (target gene:理論上高表現量; internal control:beta-actin). 疑惑中~. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
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