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討論串[問題] 關於Ni2+ column
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#3
Re: [問題] 關於Ni2+ column
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者skylawer (skylawer)時間19年前 (2007/01/11 01:28), 編輯資訊
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1M imidazole 下不來很不尋常 (且不合理). 用 0.5 M EDTA 把 Ni 懈下來吧.. 看 protein 有沒有跑出來. 再沒有 0.1M NaOH wash 把 protein denature 下來吧. 走到這一步 代表你protein 已 aggregate 在 gel
#2
Re: [問題] 關於Ni2+ column
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者iceoo (醉心於巴黎)時間19年前 (2007/01/11 00:45), 編輯資訊
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推 Bluecold:pH? 01/10 06:49推 aggaci:沒結合上去吧?通column前後，target protein量有改變嗎? 01/10 14:19推 wensing:用到1M imidazole相當高濃度！ 01/10 18:00→ wensing:我只用300mM就可以洗下來
(還有349個字)
#1
[問題] 關於Ni2+ column
推噓4(4推 0噓 1→)留言5則，0人參與, 最新作者iceoo (醉心於巴黎)時間19年前 (2007/01/10 01:24), 編輯資訊
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請問一下 在用imidazole洗純化之蛋白質的時候. 因為用1M imidazole去洗還是得不到我要的蛋白質. (用SDS-PAGE沒壓到 但pri-bind有壓到). 所以就再提高imidazole的濃度 當提高到2M時. 在洗的過程中 帶有Ni2+的 resin逐漸由綠色轉為紫色. 請問是為
(還有28個字)
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