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討論串[問題] 請問lysis buffer和要跑的蛋白有相關嗎？
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#5
Re: [問題] 請問lysis buffer和要跑的蛋白有相關嗎？
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者hunnan (猴子嘰嘰叫)時間19年前 (2007/03/16 06:55), 編輯資訊
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lysis buffer的目的只是在把細胞弄破讓裡面的protein流出來. 還有維持protein的穩定而已. 所以要用什麼基本上是要看你想粹取的protein在那個位置. 還有這個protein自己本身的特定. 來決定lysis buffer的組成. 刮刀reuse用酒精噴一下然後擦乾淨就可以了
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#4
Re: [問題] 請問lysis buffer和要跑的蛋白有相關嗎？
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu.時間19年前 (2007/03/14 06:45), 編輯資訊
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※ 引述《LIAR.bbs@ptt.cc (墮天使)》之銘言：. > 感謝你的回應。. > 所以通常lysis是只分說要不要跑磷酸化嗎？沒磷酸化就通通RIPA這樣嗎？. 就我所知 RIPA 用在磷酸化蛋白質上沒有什麼特殊的問題. 不過也有人說 偵測磷酸化如果碰上問題 可以換用別種 buffer 這方
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#3
Re: [問題] 請問lysis buffer和要跑的蛋白有相關嗎？
推噓3(3推 0噓 0→)留言3則，0人參與, 最新作者LIAR (墮天使)時間19年前 (2007/03/14 00:01), 編輯資訊
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※ 引述《boblu.bbs@beta.life.nthu.edu.tw (六百)》之銘言：感謝你的回應。. 所以通常lysis是只分說要不要跑磷酸化嗎？沒磷酸化就通通RIPA這樣嗎？. 另外請問嚕well時要怎麼知道細胞有破的很完全？會不會有細胞沒破或是根本沒括下來. 的情況？. 還有，因為我這邊
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#2
Re: [問題] 請問lysis buffer和要跑的蛋白有相關嗎？
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者boblu.時間19年前 (2007/03/13 20:55), 編輯資訊
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沒有特別原因的話 就用 RIPA 就好了啊. 其實如果單純是跑 western, 隨便什麼都可以. 直接把 loading buffer 加到 dish 上，嚕一嚕就可以收起來了. 這方法尤其在細胞量不大（12, 24 well plate）的時候好用. --. 莫非定律:. 到了期末才會想起期初曾
#1
[問題] 請問lysis buffer和要跑的蛋白有相關嗎？
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者LIAR (墮天使)時間19年前 (2007/03/12 23:31), 編輯資訊
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我目前正在學WESTERN BLOT，我們實驗室有兩種lysis buffer，一種是直接用triton. 打完測total protein，再用另一種lysis buffer（深藍色）處理同樣條件的細胞。. 我學長說這是因為他做磷酸化蛋白，深籃色的buffer無法測total protein，所以
(還有342個字)
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