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[ Biotech ]
討論串[求救] colony PCR有P到 但定序無結果
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隨便放一點點(記得,真的要"一點點"!)transformation 用的. competent cell solution 在沒有抗生素的agar plate 上就能得到一堆. 這個描述聽起來就是colony 同時有兩種plasmid 的情況. (在假設那個1 kb 是正確product 而非no
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colony PCR check 有結果,最後amplify出來的plasmid不對. 最常見的原因就是部份或不完整的的ligation product. 混在最後的transformation solution 中一起被塗在agar plate上. 然後被敏感度很高的PCR 偵測到. 但其實不是你
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1. 你挑的是藍的還是白的?.. 白的. 2. 你的insert 的來源是那裡?.. 放在 yT&A vector 中的某個基因 我要在他兩端加上切位 所以抽plamid 做模板去p. 3. 放個沒有transform 的 E.coli 再 PCR 一次看看. 順便做一個只放空vector (沒有菌
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