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討論串[求救] DNA電泳
共 10 篇文章
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#10
[求救] DNA電泳
推噓7(7推 0噓 7→)留言14則，0人參與, 最新作者j31yo20 (j31yo20)時間12年前 (2013/08/28 09:26), 編輯資訊
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請問我把用RE作用完的plasmid DNA 拿去跑電泳，我設計要拿294bp的片段，但是照膠完發現小片段的band沒有很亮，大片段的很亮，是不是片段越小就越暗呢？小弟是用內染劑，DNA片段越小，嵌入的越少，所以比較暗？. --. Sent from my Android. --. ※ 發信站: 批
#9
[求救] DNA電泳
推噓4(4推 0噓 14→)留言18則，0人參與, 最新作者vbhero (GOD)時間15年前 (2010/10/01 11:04), 編輯資訊
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最近在跑DNA電泳時出現了一些問題. 1.同時做出來的膠片，有些跑完電泳後(20~25mins)，大約在500bp會出現凹陷. 沒錯，肉眼觀察就可以看到的凹陷，拿去照膠，果然500bp以下的DNA都不見了. 有人說這是膠沒有均勻，或是沒有全溶的結果，可是我都有用stir去轉. 也都會確認有沒有剩下沒
(還有83個字)
#8
Re: [求救] DNA電泳
推噓1(1推 0噓 4→)留言5則，0人參與, 最新作者yashi (我要天天快樂快樂)時間16年前 (2009/07/22 15:44), 編輯資訊
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我們老師只覺得用melting curve看不出來 分子量. 而且他喜歡"眼見為憑"的感覺 嗯嗯 這點我也不確定是產物本身就不專一 還是膠讓它smear. 不過我還滿相信melting curve的 可是我以前用相同條件跑. 我覺得結果還ok哎！！. http://www.wretch.cc/alb
#7
Re: [求救] DNA電泳
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者chl20020933 (chl20020933)時間16年前 (2009/07/22 14:52), 編輯資訊
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昨天看到已經很晚了 所以到現在才回. 同s大表示 如果是這些問題 你的marker不會那麼清楚. 這我沒有做很多. 不確定real-time偵測到的螢光 比實際的"specific" PCR product是不是絕對正確. 也不知道是不是這原因 你們老師才要求你要跑GE. 但是gel圖看起來 不知道
(還有170個字)
#6
Re: [求救] DNA電泳
推噓1(1推 0噓 16→)留言17則，0人參與, 6年前最新作者yashi (我要天天快樂快樂)時間16年前 (2009/07/22 11:51), 編輯資訊
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^^^^^^^^^^^^^^. 有點不了解s大說的意思 因為我的系統就是real-time PCR. 只是老師想再跑膠而check size ps我們老師一直逼我. → bobbygau:別做melting curve。SYBR Safe/Green染小片段效果不佳， 07/22 11:09 ？？？
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