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討論串[問題] 關於restriction enzyme digest
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Re: [問題] 關於restriction enzyme digest
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者rangelovero ( L'Arc~en~Ciel)時間18年前 (2008/02/22 20:52), 編輯資訊
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從這裡看來應該是沒有被切開的vector直接轉到host. 使得你後來挑到的點都是vector. 5ug太多啦 不然你就分開切. NEB的enzyme通常是1ug DNA 加 1ul的酵素可在一小時內作用完成. 一小時是平均值 會隨著酵素不同而改變. 你使用的EcoR1及HindIII都還滿好切的啦
(還有51個字)
#1
[問題] 關於restriction enzyme digest
推噓5(5推 0噓 1→)留言6則，0人參與, 最新作者snowypuppy (啦啦啦....)時間18年前 (2008/02/20 02:26), 編輯資訊
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想請問大家. 我現在用EcoR1及HindIII將vector及insert做RE digest. 做ligation之後長出來的怎麼挑colony卻都是vector的size. 懷疑是vector沒有切乾淨 (我是取5ug 切2小時) 之後做gel purify. 問題是兩個enzyme切下來的片
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