討論串[求救] real time PCR variation 很大(同sample)
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者meiosisLin (吽爸)時間18年前 (2008/03/20 14:03), 編輯資訊
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我算了一下妳的primer. self dimer, cross dimmer ,hairpin都沒什麼問題(或者說真的還不錯). primer濃度稍微高了點. 妳的濃度是400 nM final con.. ABI的建議在100~300 nM...這個部分可以試著降低點. And 妳是用SYBR
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者apoptosis (good job)時間18年前 (2008/03/20 11:41), 編輯資訊
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謝謝大家推文回應 下面是回應推文的問題. 我們實驗室只有我一個人做 很多東西我都不太懂 請教一下前輩. 1. 我不知道怎麼作melting curve 稍微看了一下 好像是在amplify之後. 請問軟件上面是否就有內建的程式可以跑 我用的是SDS2.0. 2. 我的primer是別人設計的. GC
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推噓4(4推 0噓 1→)留言5則,0人參與, 最新作者apoptosis (good job)時間18年前 (2008/03/19 12:14), 編輯資訊
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最近作real time遇到困難. 我的問題是這樣. 1.primer + mixture 也有大約20~30 cycle, 我懷疑污染 就去跑膠. run gel發現有加cDNA的有兩條BAND,. 一條在100bp 是我的產物 另一條在約50bp 我懷疑是primer dimer.. 如果不加c
(還有154個字)
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