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討論串[求救] DNA總是切不好
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#3
Re: [求救] DNA總是切不好
推噓2(2推 0噓 0→)留言2則，0人參與, 最新作者beautyfish (天使光)時間18年前 (2008/05/05 15:44), 編輯資訊
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不好意思自己回自己的文XD. 我後來DNA已經有切好了. 我的切法是取20ug的DNA 把體積切到50ul. 此時酵素用的量為1.5ul. 切了3~4小時後 又補了一次1.5ul的酵素. 這邊是用1.5ul的酵素加buffer之後補水讓總體積成為50ul. 再加進去到原先切的那50ul的reacti
(還有61個字)
#2
Re: [求救] DNA總是切不好
推噓1(1推 0噓 5→)留言6則，0人參與, 最新作者MrCAKE (Keep Working)時間18年前 (2008/05/02 12:14), 編輯資訊
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你的DNA純度可能有問題. 像是protein、polysaccharides、RNA等抽DNA時殘存的汙染. 都可能影響限制脢的作用. 我建議可以再純化一下你的DNA. 或是限制脢作用時把總體積放大來切. 像是把20ul的總體積放大成200ul(限制脢的量不用改變). 應該就可以有效的改善切不好的
#1
[求救] DNA總是切不好
推噓9(9推 0噓 11→)留言20則，0人參與, 最新作者beautyfish (天使光)時間18年前 (2008/05/01 23:14), 編輯資訊
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我目前在做 Southern Blot 已經卡很久了. 跟實驗室其他人用一樣的產品跟Buffer但很常沒成功. 通常都是背景值過深 所以無法看出對比. 但是我洗片的流程都有按照protocol再延長一倍的時間. 前陣子好不容易做出來. 但最近要做repeat data又發現DNA切不好. 我用的酵素
(還有228個字)
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