討論串[求救] 使用pET-29載體進行ligation
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者veltine (Time go by~~~)時間17年前 (2008/08/30 04:12), 編輯資訊
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(1)設計具有酵素切位的primer,請上NEB網頁上的Cleavage Close to the End of DNA. Fragments查詢,除了加入酵素切位序列外,記得還要多加1個或2個以上的. base pair,以利酵素進行切割。(我猜的理由:讓酵素有地方bind進行切割). (2)do
(還有339個字)

推噓3(3推 0噓 5→)留言8則,0人參與, 最新作者bbiioo (梅子)時間17年前 (2008/08/29 00:18), 編輯資訊
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最近一個約1.5kb的片刻要表現. 是用pET-29進行Ligation. 切位是 NdeI & XhoI. 我是兩種酵素同時去切,再接. 轉形後!!. 也有長出菌株. 可是抽出的質體. 我再用酵素cleavage確定有沒接上. 可是...就是切不出我要的(size不對...). 問的結果說是可能當
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