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[求救] 請問ligation後出現突變的問題
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Re: [求救] 請問ligation後出現突變的問題
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lenti
(啄木鳥)
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17年前
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(2009/05/16 15:20)
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問題主要是在PCR, 你可能需要用好一點的taq.. 或者, 在PCR mix中, 再外加 Mg2+, 也可以提高PCR 的正確率.. 當然, 降低 cycle 數也是可以考慮的.. 至於同一個plate是否可以再挑, 當然可以.. 雖然有可能挑到正確的, 只是機會較小.. --.
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[求救] 請問ligation後出現突變的問題
推噓
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1則,0人
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作者
SugarSa
(Mr.)
時間
17年前
發表
(2009/05/16 00:02)
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我的實驗是用從template當中P出我要的片段再接到vector中. 但是好不容易接進去之後,挑colony、送定序卻發現insert錯了兩個點. 由於之前有用同一個template P出序列正確的片段. 所以可以排除是template問題. 現在我的問題是. 現在如果從同一個plate中,再挑新
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