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討論串[求救] pichia pastoris X-33 transformation
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Re: [求救] pichia pastoris X-33 transformation
推噓3(3推 0噓 2→)留言5則，0人參與, 最新作者littlelizard (專注)時間16年前 (2010/03/10 21:07), 編輯資訊
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我是用pPICZaA 宿主用 Pichia pastoris KM71H. 用Sac I 去切 (如果用Bgl II轉型率會低很多). 大概就是切在 AOX promoter 本身上游的部分會比較好. 24 h之後 OD600 = 12~13接完之後OD600 = 0.15 比較好. 大約6 h O
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[求救] pichia pastoris X-33 transformation
推噓2(2推 0噓 22→)留言24則，0人參與, 最新作者relaxsleep (火球連發~)時間16年前 (2010/03/03 13:00), 編輯資訊
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請問各位. 我目前在做pPICZaC分別插入三段片段 轉殖到P. pastoris X-33. 先使用PmeI去切線性質體(需要clean up嗎?). 升任細胞製作是培養3ml YPD overnight 30度 250rpm. 在隔天取100ul接種到100ml YPD約八小時長到OD600 1
(還有399個字)
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