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討論串[請益] primary culture用的DNaseI
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#4
Re: [請益] primary culture用的DNaseI
推噓2(2推 0噓 3→)留言5則，0人參與, 最新作者aggaci (可找我下棋..)時間12年前 (2013/10/01 18:40), 編輯資訊
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我也有養過primary neuron. 到業界一陣子了 但大部分都還記得. 自認我養neuron養的還不差 而我從沒用過DNaseI. 在trypsinzation那一步時 輕輕地搖晃 絕對不能用pipeting. 理論上就不會傷害細胞 genomic DNA也就不會跑出來. 這是我的小小經驗嚕.
#3
Re: [請益] primary culture用的DNaseI
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者martyrtitan (Martyrs)時間12年前 (2013/10/01 15:51), 編輯資訊
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很久之前的文章. 但最近遇到一些初代細胞問題. 想請教各位前輩... 1. sigma的DNase I: DN25(我用的) 和 D4527 應該都是需要二價離子輔助吧?. 那理論上就如同前文所說的Trypsin不能含有EDTA在裡面. 但我看的 Cuturling Hippocampal Cell
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#2
Re: [請益] primary culture用的DNaseI
推噓3(3推 0噓 1→)留言4則，0人參與, 最新作者LIAR (玻璃做的大叔)時間13年前 (2012/04/24 00:21), 編輯資訊
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我用sigma D4527，應該有更便宜的。. 我覺得經驗比你算半天還有用，如果過程沒有傷到太多，我有遇過不加都可以過40um，. 但有時太暴力，就算加兩倍還有鼻涕XD. 另外就是保存的問題，來回解凍或是配太久效力會下降，我第一次買新的用，. 其效果之強令人驚豔，就算把量降到50%，都能在一分鐘內把
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#1
[請益] primary culture用的DNaseI
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者latte366 ( )時間13年前 (2012/04/23 22:33), 編輯資訊
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請問有做primary culture用的DNaseI. 大家一般用量是每多少mg的tissue加多少量的DNase I去作用?. 同樣的作用原理用在cell line的culture應該也OK吧? 只是用量可以減少?. 還有大家有買過哪家的比較便宜的嗎? 價格/per unit. 爬過文沒有看到相
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