Re: [請益] primary culture用的DNaseI

看板Biotech (生命科學)作者 (玻璃做的大叔)時間13年前 (2012/04/24 00:21), 編輯推噓3(301)
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※ 引述《latte366 ( )》之銘言: : 大家一般用量是每多少mg的tissue加多少量的DNase I去作用? : 同樣的作用原理用在cell line的culture應該也OK吧? 只是用量可以減少? : 還有大家有買過哪家的比較便宜的嗎? 價格/per unit : 爬過文沒有看到相關的資訊 我用sigma D4527,應該有更便宜的。 我覺得經驗比你算半天還有用,如果過程沒有傷到太多,我有遇過不加都可以過40um, 但有時太暴力,就算加兩倍還有鼻涕XD 另外就是保存的問題,來回解凍或是配太久效力會下降,我第一次買新的用, 其效果之強令人驚豔,就算把量降到50%,都能在一分鐘內把鼻涕給弄不見。 另外一個小插曲:D4527有說要二價離子輔助,但有一次我白目拿到有EDTA-trypsin 去處理tissue,不用說,鼻涕一下就堵住篩網了,就算我DNase加到兩倍量都沒用。 -- 起初,他們追殺共產主義者,我沒有說話,因為我不是共產主義者; 接著,他們追殺猶太人,我沒有說話,因為我不是猶太人; 後來,他們追殺工會成員,我沒有說話,因為我不是工會成員; 此後,他們追殺天主教徒,我沒有說話,因為我是新教教徒; 最後,他們奔我而來,卻再也沒有人站起來為我說話了。 《First They Came(他們首次來時)》,Martin Niemoller牧師(1892-1984) -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 180.176.42.36

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我從來沒加過DNaseI trypsin那步溫和搖晃即可
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04/28 22:17, , 2F
感謝 不過我做primary glia cell culture加不加有差耶
04/28 22:17, 2F

04/28 22:18, , 3F
不過還是謝謝大家的建議 ^^
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05/17 22:04, , 4F
謝謝L大~我終於找到我primary culture充滿鼻涕的原因了
05/17 22:04, 4F
文章代碼(AID): #1FbO5xCv (Biotech)
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