Re: [請益] primary culture用的DNaseI
※ 引述《latte366 ( )》之銘言:
: 大家一般用量是每多少mg的tissue加多少量的DNase I去作用?
: 同樣的作用原理用在cell line的culture應該也OK吧? 只是用量可以減少?
: 還有大家有買過哪家的比較便宜的嗎? 價格/per unit
: 爬過文沒有看到相關的資訊
我用sigma D4527,應該有更便宜的。
我覺得經驗比你算半天還有用,如果過程沒有傷到太多,我有遇過不加都可以過40um,
但有時太暴力,就算加兩倍還有鼻涕XD
另外就是保存的問題,來回解凍或是配太久效力會下降,我第一次買新的用,
其效果之強令人驚豔,就算把量降到50%,都能在一分鐘內把鼻涕給弄不見。
另外一個小插曲:D4527有說要二價離子輔助,但有一次我白目拿到有EDTA-trypsin
去處理tissue,不用說,鼻涕一下就堵住篩網了,就算我DNase加到兩倍量都沒用。
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起初,他們追殺共產主義者,我沒有說話,因為我不是共產主義者;
接著,他們追殺猶太人,我沒有說話,因為我不是猶太人;
後來,他們追殺工會成員,我沒有說話,因為我不是工會成員;
此後,他們追殺天主教徒,我沒有說話,因為我是新教教徒;
最後,他們奔我而來,卻再也沒有人站起來為我說話了。
《First They Came(他們首次來時)》,Martin Niemoller牧師(1892-1984)
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