討論串[求救] 新手想仔細請教電穿孔法步驟
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者puec2 ( .__________.)時間12年前 (2013/09/04 22:41), 編輯資訊
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不需要等菌液"溶" 直接用tip戳一些冰塊下來 丟進medium裡面養即可. 10000/50=200倍 有點高 我大多習慣500X稀釋. 0.5算少 0.5~0.7都可以. 這步OK. 這步倒上清液的時候 pellet可能會很鬆 要小心. 要先過乾冰或者液態氮再放進-80. 是配好的10%glyc
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推噓0(0推 0噓 4→)留言4則,0人參與, 最新作者a72830044 (a72830044)時間12年前 (2013/09/04 01:33), 編輯資訊
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小弟目前正要開始嘗試用電穿孔法 overcross兩段基因. 大致上的流程是懂了,但是一些細部的部分不是很了解. 從一開始拿出-70度C的菌液就不太懂. 1.拿出菌液後置於冰上,待其微溶時取 5ul加至 5ml培養液中震盪隔夜培養. 2.隔日從過夜菌液中取 50ul加入 10ml培養液中震盪培養 2
(還有608個字)
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