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討論串[求救] TA cloning相關問題
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#3
Re: [求救] TA cloning相關問題
推噓5(5推 0噓 18→)留言23則，0人參與, 最新作者blence ( )時間10年前 (2015/08/02 02:23), 10年前編輯資訊
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既然提到colony PCR (cPCR)的需求. 我也回應我的觀點. 問題起源與關於cPCR的使用時機與功能. 假使24,48甚至2x48都可以作為cPCR的組數. 那不知道這個的limitation在哪裡？. 抑或熟手cPCR在3,4,或6組就足以挑到或幾乎都是candidate. 那何不直接m
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#2
Re: [求救] TA cloning相關問題
推噓8(8推 0噓 9→)留言17則，0人參與, 最新作者xxtomnyxx (翼天)時間10年前 (2015/08/01 15:34), 10年前編輯資訊
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我做 cloning 一向都是用 colony-PCR 挑菌，. 到現在從來沒有遇到偽陽性，. 有挑到的拿來抽 mini 都是正確的 plasmid。. 只要知道為什麼會有偽陽性，. 就可以設計適當的 control 來排除偽陽性，. Invitrogen 的 TOPO-TA kit 裡應該會有附
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#1
[求救] TA cloning相關問題
推噓8(8推 0噓 35→)留言43則，0人參與, 最新作者a7225463 (明智)時間10年前 (2015/07/27 19:08), 編輯資訊
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我是借用朋友帳號po文的...謝謝. 小妹我先用Taq p出我要的片段約650 np，然後照invitrogen的TOPO TA Cloning附的protocol進行ligation:取1 ul的PCR產物及2 ul的pCR2.1 vector作用室溫1 hr，接著做transformation用
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