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討論串[問題] pET expression vector的選定
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之前將我的insert接到pGEX4T1這個vector. 定完序列也送到BL21作表現蛋白質. 同時也有做空pGEX4T1做control. 可是做了很久. 一直沒有看到我的fusion protein有被表現出來. 但是空的pGEX4T1卻明顯有出來. 和老師討論過後 老師也不知道為什麼會這樣.
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※ 引述《cloud74115.bbs@ptt.cc (阿亮)》之銘言:. > 之前將我的insert接到pGEX4T1這個vector. > 定完序列也送到BL21作表現蛋白質. > 同時也有做空pGEX4T1做control. > 可是做了很久. > 一直沒有看到我的fusion protein
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空vector的有出來(GST 27 KD). fusion的沒有出來(fusion protein 87 KD). lysate的部份也有跑 可是一樣都沒有出來(可是空的pGEX有GST出來). 另外我induction的環境是. 2 mL菌液overnoght, 隔天1:20 total 2 m
(還有250個字)
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