討論串請問怎麼把蛋白質從PAGE上elute出來?
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者timbrian (perk yourself up)時間19年前 (2006/06/28 23:30), 編輯資訊
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先解決 R大的問題... .. 呵呵 注意我的文章.. 我的文章只說 control 組要染 因為這是對照組. 我可沒說原po 的 target protein要染喔. 因為對造組不染的話 你無從觀察到底電出來沒阿..(從dye 的 difussion). 至於不染怎知你的 target prote
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)時間19年前 (2006/06/28 22:07), 編輯資訊
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那就把EMSA以後的PAGE有訊號的地方挖下來. 然後用液態氮磨碎,當然之後要放一點DNase. (畢竟用isotope label的東西還是月少接觸其它東西越好). 接著去跑SDS-PAGE. (做到這邊就可以拿去做protein identity了,反正denature form也沒差). 之後
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推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者aggaci (有氣質的台客)時間19年前 (2006/06/28 22:03), 編輯資訊
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白色???是透明還是白色?. 為什麼得用冰的哩?. 這個..............不知道多少哩. 他應該是個complex. 歹勢. 我講一下實驗流程好了. 我有一段oligonucleotide 其中5端lebel FITC. 拿去做EMSA. 我預期可以看的到shift(isotope有,pa
(還有98個字)

推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者aggaci (有氣質的台客)時間19年前 (2006/06/28 22:01), 編輯資訊
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透析膜阿?. 可是切下來的gel不就小小一塊. 用到透析膜感覺像是buffer相對於gel要加不少吧?(1 cc要嗎?). 那降子不就被大量稀釋了. --. http://0rz.net/da0PG 我的相簿..... 興趣:做實驗、看PAPER、玩音響、聽音樂、養楓葉鼠、彈鋼琴. --. 發信

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)時間19年前 (2006/06/28 21:59), 編輯資訊
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不建議用CBR染色 蛋白會被fix在膠裡面. 推薦用冰的0.25M KCl. 挖白色的band,記得一定要用冰的!. pI>7 用CAPS. pI<7 用1xTAE. 其實原po的a兄沒講實驗目的大家也很難幫您想辦法阿 :~~~. --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From:
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