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討論串[問題] RT-PCR for Full lenth cDNA
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Re: [問題] RT-PCR for Full lenth cDNA
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者asplash (我好想你~)時間19年前 (2006/07/18 20:08), 編輯資訊
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第一個 PRIMER要注意你的TM可以試看看用58度~~. G/C越高 越難P阿...還有你的3000bp的片段... extension時間需要看你的Taq能力唷...普通的taq差不多也要120秒... 還有建議你!!這麼長的片段最好用好點的Taq 有proofreading的比較好... 不然
(還有22個字)
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[問題] RT-PCR for Full lenth cDNA
推噓3(3推 0噓 1→)留言4則，0人參與, 最新作者bluestanley (好想吃蘋果...)時間19年前 (2006/07/08 20:21), 編輯資訊
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最近要P約3000bps的一段full lenth cDNA. 因為primer沒得選擇只能用ORF的頭尾兩段. 廠商送來的Primer Tm值差了約5度左右 (61度&56度 G/C約50%). 但是一直P不出來 快要發瘋了. 想請問一下各位高手 P大片段DNA時所用的condition是怎樣呢?
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