[問題] RT-PCR for Full lenth cDNA

看板Biotech (生命科學)作者 (好想吃蘋果...)時間19年前 (2006/07/08 20:21), 編輯推噓3(301)
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最近要P約3000bps的一段full lenth cDNA 因為primer沒得選擇只能用ORF的頭尾兩段 廠商送來的Primer Tm值差了約5度左右 (61度&56度 G/C約50%) 但是一直P不出來 快要發瘋了 想請問一下各位高手 P大片段DNA時所用的condition是怎樣呢? 或者有什麼要注意的地方呢? 謝謝大家指教 ^^ -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 203.70.51.143

07/09 00:47, , 1F
偷問一下,我要做inverse PCR,夾10kb的self-ligate DNA
07/09 00:47, 1F

07/09 00:48, , 2F
版上有高人可以指點一下嗎?@_@ 失敗很多次了 /_\~~
07/09 00:48, 2F

07/10 00:52, , 3F
你的template用的是什麼library?還有你試過什麼條件ꤠ
07/10 00:52, 3F

07/10 15:52, , 4F
我也覺得你把條件列出來會比較好...關於primer可以自己設計
07/10 15:52, 4F
文章代碼(AID): #14hwDMGj (Biotech)
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