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討論串請問ligation check
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#4
Re: 請問ligation check
推噓2(2推 0噓 2→)留言4則，0人參與, 最新作者ssuny (Cheer up!!!)時間19年前 (2006/08/22 22:56), 編輯資訊
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用這個方法時agarose膠的percentage要高一點...不然會分離不出來.... 要記得跑control組...不然會不知道怎麼比. 此外..我不太清楚這方法是不是有適用於一些特定的host.... 我只知道以前作都做的出來...現在到新的實驗室後用這方法卻都做不出來... 囧囧囧....
#3
Re: 請問ligation check
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者aggaci (Desperado)時間19年前 (2006/08/22 19:45), 編輯資訊
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學長有說一個方法. 有用到phenol-chloroform. onernight culture=>離心=>pellet以phenol+chloroform+DNA dye溶解. =>離心=>supernatant 取 15 micro-liter跑電泳. 直接看有接insert和空的plasmi
#2
Re: 請問ligation check
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Duckhunter (Duckhunter)時間19年前 (2006/08/22 19:26), 編輯資訊
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是有專門給GC rich序列使用的 PCR polymerase. 不過那會比你用限制脢來的更貴上10倍. PCR做不出來. 用限制脢已經是很便宜的方法了. ※ 引述《aggaci.bbs@bbs.wretch.cc (來吧~五子棋)》之銘言：. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc).
#1
請問ligation check
推噓6(6推 0噓 0→)留言6則，0人參與, 最新作者aggaci.時間19年前 (2006/08/22 11:00), 編輯資訊
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請問一下. 大家的ligation check的方法都是什麼?. PCR check?digestion check?. 我最近clone 1個基因(1.5kb但是GC rich)到pcDNA3上面. PCR check都check不到. (enzyme應該沒壞，因為空的vector有amplifi
(還有200個字)
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