請問ligation check

看板Biotech (生命科學)作者時間19年前 (2006/08/22 11:00), 編輯推噓6(600)
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請問一下 大家的ligation check的方法都是什麼? PCR check?digestion check? 我最近clone 1個基因(1.5kb但是GC rich)到pcDNA3上面 PCR check都check不到 (enzyme應該沒壞,因為空的vector有amplifiy的fragment) 挑個幾顆去做digestion check, 本來PCRcheck沒東西的,digestion check卻有...... 我是覺得應該有接近去只是PCR沒辦法做出來....... 不曉得有沒有其他的方法可以confirm 因為RE的酵素也是挺貴的! -- 夫兵者不祥之器物或惡之故有道者不處君子居則貴左用兵則貴右兵者不祥之器非君子 之器不得已而用之恬淡為上勝而不美而美之者是樂殺人夫樂殺人者則不可得志於天下 矣吉事尚左凶事尚右偏將軍居左上將軍居右言以喪禮處之殺人之眾以哀悲泣之戰勝以 喪禮處之道常無名樸雖小天下莫能臣侯王若能守之萬物將自賓天地相合以降甘露民莫 之令而自均始制有名名亦既有夫亦將知止知止可以不殆d928220.life.nthu.edu.tw

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quick-squeen?
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sequencing check! 一翻兩瞪眼
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08/22 19:24, , 3F
你可以拿去定序了呀~不是有限制脢切過的CLONE?
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08/22 19:45, , 4F
定序還挺貴的
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08/22 19:54, , 5F
當然有切出來的還是會送定序
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09/03 20:53, , 6F
HIGH G+C PCR 時候加入終濃度10% DMSO可試試 我ㄧ個70% 沒
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