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討論串[問題] 我的insert切不下來
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#3
Re: [問題] 我的insert切不下來
推噓1(1推 0噓 2→)留言3則，0人參與, 最新作者s73121 (ok)時間19年前 (2006/08/25 09:17), 編輯資訊
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400bp跑完膠可能會太淡看不太到..再加上你經過phenol/chloroform純化. 一定會lost一些..所以建議你digest完直接跑膠... 若要確定enzyme是否有作用可以分別做single digestion. 跑完膠看size就知道是否有切動了.. --. ※ 發信站: 批踢踢實
#2
Re: [問題] 我的insert切不下來
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者melodyrabbit (melody)時間19年前 (2006/08/23 01:52), 編輯資訊
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你的DNA濃度呢?. 只取10ul的話,很可能它是有切下來的,只是切出來的band太淡了看不到. 而且之後去ligation的話insert也需要多一點阿確定你的enzyme buffer有用對嗎?. 定序後切點的位置有突變嗎?意思就是這兩種酵素的作用溫度不同,buffer也不同,所以不能同時切要切
#1
[問題] 我的insert切不下來
推噓2(2推 0噓 2→)留言4則，0人參與, 最新作者CloudTear (照片能吃嗎？口去～)時間19年前 (2006/08/23 01:29), 編輯資訊
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不好意思，請高手幫幫我. 1.就是我的目標基因 （insert，約400bp），接上T-A Vector，. 送入E .coil中transform放大之後，. 無法從T-A Vector 上切下來，. 就無法把insert送去構築在我所想構築的另一個Vector上。. 我是這樣做的：. 有接ine
(還有660個字)
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