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討論串[問題] RT PCR的問題
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#3
Re: [問題] RT PCR的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者aggaci (學鋼琴，左手怎麼那麼笨)時間19年前 (2006/10/05 21:23), 編輯資訊
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我想這根enzyme用量無關. 你拿cDNA去測濃度，差不多是很正常的. 因為測的幾乎都是free dNTP的在吸光. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.114.100.165. ※ 編輯: aggaci 來自: 140.114.100.165 (10/0
#2
Re: [問題] RT PCR的問題
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/10/05 21:03), 編輯資訊
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天啊，你的RT enzyme用很多吧，還可以拿去測OD?. 3ug是多了點....1ug錯錯有餘，基本上我覺你的問題再rt..... 建議你考慮1> Oligo dT還是random heximer?你要ｐｃｒ的基因其mRNA有枚特殊結構？. 2> denature是否確實？建議反複一次在加入RT的
#1
[問題] RT PCR的問題
推噓1(1推 0噓 0→)留言1則，0人參與, 最新作者iris0542 (gg)時間19年前 (2006/10/04 17:43), 編輯資訊
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我現在在做RT PCR. 不管我怎麼試internal control跑PCR後. 就是不一樣多. 我絕得很奇怪 所以就拿了cDNA去測量. 發現量其實沒有差很多. 所以我又拿了cDNA含量較近的幾管去跑PCR. 結果GAPDH還是有的多 有的少 ~~. 還有有的基因根本就只有positive co
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