討論串[問題]請問各位有關於PCR再現性問題
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推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者circleming (新世紀音樂)時間19年前 (2006/11/01 10:56), 編輯資訊
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我之前也有這樣的問題,. 但是到最後解決的方法卻很扯:. 問了幾個實驗室,. 他們也跟我說可能template有問題~畢竟我是第一次抽mRNA然後cDNA synthesis... 但是template OD ratio還OK~ -_-". 重新再做一次cDNA...同樣沒用~. 還考慮會不會是水的
(還有284個字)

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/10/27 03:03), 編輯資訊
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你PCR的template是 genomic DNA?. 考慮RT是否沒問題?你用OligodT還是random Heximer?. cDNA的保存方式?通常放越久越不好. 考慮添加物如DMSO或Betaine...... --. 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 210

推噓1(1推 0噓 0→)留言1則,0人參與, 最新作者piggylo (piggy)時間19年前 (2006/10/26 21:04), 編輯資訊
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目前我做的PCR或RT-PCR都會面臨到再現性不好的問題. 例如有些sample第一次跑是會有產物的,可是之後再多跑幾次又會不見了. 為了排除是否因為DNA或cDNA品質不好,. 我有檢查過DNA的ratio以及cDNA的GAPDH表現. 結果都是OK的,可是往往在做PCR或RT-PCR時,就會出現
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