Re: [問題]請問各位有關於PCR再現性問題
看板Biotech (生命科學)作者Mouseking (叫我老鼠王....-_-)時間19年前 (2006/10/27 03:03)推噓0(0推 0噓 0→)留言0則, 0人參與討論串2/3 (看更多)
※ 引述《piggylo (piggy)》之銘言：
: 目前我做的PCR或RT-PCR都會面臨到再現性不好的問題
: 例如有些sample第一次跑是會有產物的，可是之後再多跑幾次又會不見了
: 為了排除是否因為DNA或cDNA品質不好，
: 我有檢查過DNA的ratio以及cDNA的GAPDH表現
: 結果都是OK的，可是往往在做PCR或RT-PCR時，就會出現反反覆覆不同的結果
: 讓我很困擾，因為自己無法解決也沒辦法向老師報告實驗結果
: 因此希望在這裡可以請教各位看看是否是哪邊有問題，謝謝。
你PCR的template是 genomic DNA？
考慮RT是否沒問題？你用OligodT還是random Heximer?
cDNA的保存方式?通常放越久越不好
考慮添加物如DMSO或Betaine.....
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