討論串[問題] 關於Inclusion Body的純化
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推噓3(3推 0噓 5→)留言8則,0人參與, 最新作者snowtree (blue eyes blue)時間19年前 (2006/12/06 16:01), 編輯資訊
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如果po 的protein 是his-tag 的 是沒問題. 用denature bfr 處理後 使inclusion body 回溶. 在去純化 跑sds 是可以看到protein的. GST-tag 的話 就不太行了 純化後蛋白的量一定很少很少. 甚至純化不出來 而且你接下來的實驗. 如果是需要

推噓0(0推 0噓 0→)留言0則,0人參與, 最新作者ROKEE (可不可以不要再胖下去啦~)時間19年前 (2006/12/06 15:11), 編輯資訊
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基本上 GST 是和 Glutathione Sepharose (以下簡稱resin). 上的 10 個 C 原子結合,藉此和其它 crude 分開. 如果你的蛋白這麼「頑劣」,甚至接在 GST 後面還不可溶的話. 那麼上述的這套方法並不適合你使用. 因為你的 system 含有 urea,換句話

推噓3(3推 0噓 2→)留言5則,0人參與, 最新作者brigand (台灣加油)時間19年前 (2006/12/06 06:36), 編輯資訊
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我的蛋白質已經不可能形成Native Form. 所以純化Inclusion Body是我唯一的選擇. 我的Protein 是 GST-fusion protein. 是使用 Glutathione Sepharose 來結合然後沖提出來. 想請問板上的大大們. 如果我的Inclusion Body
(還有266個字)
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