Re: [問題] 關於Inclusion Body的純化
※ 引述《brigand (台灣加油)》之銘言：
: 我的蛋白質已經不可能形成Native Form
: 所以純化Inclusion Body是我唯一的選擇
: 我的Protein 是 GST-fusion protein
: 是使用 Glutathione Sepharose 來結合然後沖提出來
: 想請問板上的大大們
: 如果我的Inclusion Body是溶在 PBS + 8M urea + 10mM PMSF 的環境下
: Glutathione Sepharose 的 binding 能作用嗎?
: PMSF 跟 Urea 是否會影響 binding 呢?
基本上 GST 是和 Glutathione Sepharose (以下簡稱resin)
上的 10 個 C 原子結合，藉此和其它 crude 分開
如果你的蛋白這麼「頑劣」，甚至接在 GST 後面還不可溶的話
那麼上述的這套方法並不適合你使用
因為你的 system 含有 urea，換句話說，連 GST-tag 都被 denature
那 resin 要認什麼?
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