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討論串[問題] Transformation使用電穿孔的方法
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#5
Re: [問題] Transformation使用電穿孔的方法
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者greenn (星星)時間19年前 (2007/01/13 00:48), 編輯資訊
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謝謝你們 ^^~~. 後來我發現. 用電穿孔的方式進行transformation時. cuvette跟 competent cell 都不要離開冰太久. 我就是因為擦cuvette擦太久 離開冰上太久. 才導致Arc的. 謝謝你們 ^^. 我現在都擦完馬上就電擊了 就不會Arc了. 謝謝你們 ^^
#4
Re: [問題] Transformation使用電穿孔的方法
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者shuyanc (趕快做出來吧！)時間19年前 (2007/01/13 00:03), 編輯資訊
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ligation product 是不是也要做 EtOH precipitation 才行？. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 124.8.107.106.
#3
Re: [問題] Transformation使用電穿孔的方法
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者buterscotch (##)時間19年前 (2007/01/12 14:40), 編輯資訊
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可能是你的e.coli culture鹽太高吧. 製作electroporation的competent cells比heat shock要多幾個步驟. 要把鹽洗掉才行. 以上是最常出錯的地方. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 124.185.225.220.
#2
Re: [問題] Transformation使用電穿孔的方法
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者snark.時間19年前 (2007/01/12 14:05), 編輯資訊
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※ 引述《greenn.bbs@ptt.cc (綠tii)》之銘言：您好. 關於您的情況. 始能是competent cell的wash 沒有做好. 培養E.coli的培養基都是高離子濃度的. 如果competent cell由表面就可以看到成淡黃色. 或是 離新後大部分都是溶液 菌量很少. (這是
(還有80個字)
#1
[問題] Transformation使用電穿孔的方法
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者greenn (綠tii)時間19年前 (2007/01/12 03:06), 編輯資訊
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各位好~~~. 我現在在進行一個實驗. 需要使用電穿孔的方式 將ligation product送到 E.coli 中. 可是我在進行電穿孔的時候. 常常都會有Arc的情況發生(ms 0.01s). 請問為什麼會這樣呢 ?. 我的ligation product totol 是10ul. 我取 2u
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