Re: [問題] Transformation使用電穿孔的方法
※ 引述《greenn.bbs@ptt.cc (綠tii)》之銘言：
: 各位好~~~
: 我現在在進行一個實驗
: 需要使用電穿孔的方式 將ligation product送到 E.coli 中
: 可是我在進行電穿孔的時候
: 常常都會有Arc的情況發生(ms 0.01s)
: 請問為什麼會這樣呢 ?
: 我的ligation product totol 是10ul
: 我取 2ul去 transform
: cuvette表面有擦乾才進行transform的
: 真的很苦惱 @@
您好
關於您的情況
始能是competent cell的wash 沒有做好
培養E.coli的培養基都是高離子濃度的
如果competent cell由表面就可以看到成淡黃色
或是 離新後大部分都是溶液 菌量很少
(這是不利的 電穿孔的菌可以盡量的濃點)
都有可能導致電阻質太低
一電就爆了
如果實驗室有學長姐可以跟他們借 他們做的試試看會不會爆
祝您實驗成功
--
我們將不會停止探索,
而探索的終點,
必將回到我們的起點,
穿過陌生而猛然意起的那扇門,
我們將第一次認識這地方,
這才發現世間仍待探索的最後一寸土地,
竟是我們當初的起點.
--
※Post by snark from snark.Dorm8.NCTU.edu.tw
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