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[ Biotech ]
討論串[問題] 確認細胞上的receptor?
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借這標題問個問題. 最近有聽到所上一位老師說. 今天ligand如果已結合receptor 應該antibody會認不到. 因為會構型改變（造成表現降低）或是下面被切斷 可能造成比原本WB的位子還要低 像是egfr 我們曾經發現phospho-egfr增加 但total egfr降低. 最近我也是碰
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真的要做卻又不想花錢買專一的抗體. 可以試試這個方法. 把這個基因的ORF接在mammalian cell expression vector上. 尾端接一個tag，如HA tag、6H、c-myc、flag-tag. 送進細胞表現. 把細胞膜收下來，直接用tag的抗體去做western blot.
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※ 引述《realism.bbs@ptt.cc ()》之銘言：既然叫 receptor 就有它要抓的東西啊. 也可以用它的 ligand 去找. 比如說 EGFR 就用 EGF 去找. 不一定要用 Anti-EGFR 抗體. 螢光標定一下拿到顯微鏡下去看最快了. 看看別的 paper 通常怎麼弄吧.
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