Re: [問題] 確認細胞上的receptor?
借這標題問個問題
最近有聽到所上一位老師說
今天ligand如果已結合receptor 應該antibody會認不到
因為會構型改變（造成表現降低）或是下面被切斷 可能造成比原本WB的位子還要低 像是egfr 我們曾經發現phospho-egfr增加 但total egfr降低
最近我也是碰到一些難題
我認知上cell line receptor本來就固定量
最近我做ELISA發現chemokine ligand有相對control增加10倍以上
但在WB看receptor反而減少
例CCR2 datasheet predict 42 KDa monorabbit
但在這位子我看到減少 反而看到35KDa增加
但我有拿positive control 是42KDa
請問35位子是否可能是cleavaged form(問過specialist他們不清楚）
學姐給我一個很妙答案 monoclone可以看到很多band應該被cleavaged 所以看35位子
我有用過confocal 去看 有增加 但WB 大家比較信
感謝
※ 引述《realism ()》之銘言：
: 我想確認某個細胞上是否真的有特定的receptor 不知道有哪些方式?
: 目前自己想到的是
: 1. QPCR去抓 (但是否會比較不準 因為不是直接去認cell表面?)
: 2. flow cytometry 去抓surface marker (不過我沒做過 是不是
: 要去找有沒有我要的protein的commercial的抗體? )
: 初學者的疑問 謝謝大家幫忙 >.<
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