Re: [問題] 確認細胞上的receptor?
看板Biotech (生命科學)作者aggaci (下棋吧 five chess)時間18年前 (2007/08/28 00:03)推噓3(3推 0噓 1→)留言4則, 3人參與討論串4/6 (看更多)
※ 引述《realism ()》之銘言：
: 我想確認某個細胞上是否真的有特定的receptor 不知道有哪些方式?
: 目前自己想到的是
: 1. QPCR去抓 (但是否會比較不準 因為不是直接去認cell表面?)
: 2. flow cytometry 去抓surface marker (不過我沒做過 是不是
: 要去找有沒有我要的protein的commercial的抗體? )
: 初學者的疑問 謝謝大家幫忙 >.<
真的要做卻又不想花錢買專一的抗體
可以試試這個方法
把這個基因的ORF接在mammalian cell expression vector上
尾端接一個tag，如HA tag、6H、c-myc、flag-tag
送進細胞表現
把細胞膜收下來，直接用tag的抗體去做western blot
(前提是必須表現的出來)
運氣夠好，抗體認的到妳接的tag(native form)
直接用tag antibody去做flow or confocal
這個方法我想不需花很多錢，卻又能達到你目的
但比較費功夫！
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http://www.wretch.cc/album/aggaci
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◆ From: 140.114.100.165
※ 編輯: aggaci 來自: 140.114.100.165 (08/28 00:19)
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