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討論串[求救] cloning 失敗好多次 就是接不起來...
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[求救] cloning 失敗好多次 就是接不起來...
推噓3(3推 0噓 0→)留言3則，0人參與, 最新作者pop6234 (表面的和平)時間17年前 (2008/03/27 03:28), 編輯資訊
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我的insert大概是1400bp. vector是pAS2-1 (Clontech). 切單刀. 所以有用CIP處理vector. 切完酵素之後跑電泳切膠. gel extraction之後. 再做ligation. 16度C overnight. 因為我的insert量很少. 所以我insert
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#2
Re: [求救] cloning 失敗好多次 就是接不起來...
推噓3(3推 0噓 3→)留言6則，0人參與, 最新作者ROKEE ( Beanazai)時間17年前 (2008/03/27 10:39), 編輯資訊
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那這組positive control長出來的colony數有合格嗎?. vector是人家給的吧? 凡是自己沒有確認過的東西都先別相信是真的. 這問題常出現在剛入實驗室的新人身上. 先不就接進去的這片段是否有細胞毒性. (就算是要順利表現活性的機率也超低,但我就衰到碰過). 小弟我覺得要先檢討你的
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