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討論串[求救] 轉殖菌放大培養
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#3
Re: [求救] 轉殖菌放大培養
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者chl20020933 (chl20020933)時間16年前 (2009/12/06 01:58), 編輯資訊
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剛好有空 回你一下吧. 你的實驗很多東西沒有確定. 標準步驟請完成 再來討論酵素活性問題. 第一 plasmid在不在 對不對. 要破菌前還是抽一下plasmid RE酵素切一下 看pattern就可以知道. 第二 蛋白質真的有純化到？. 最簡單的 western blot 有結果嗎？. pET s
#2
Re: [求救] 轉殖菌放大培養
推噓2(2推 0噓 1→)留言3則，0人參與, 最新作者ilovesea (結束了!:D樣)時間16年前 (2009/12/04 00:37), 編輯資訊
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各位版友好. 先謝謝先前的回答 讓我受益良多. 想要繼續請教：. 我目前的狀況是. 我拿了先前做的菌保. 先養在含抗生素的plate上. 他一樣有長. 因為他有長 所以我認為它質體存在. 再轉接到10mL含抗生素的broth中. 搖瓶16小時後 OD600約1.3左右. 先取出簡單破菌 測酵素活性.
#1
[求救] 轉殖菌放大培養
推噓3(3推 0噓 14→)留言17則，0人參與, 7年前最新作者ilovesea (結束了!:D樣)時間16年前 (2009/11/23 20:52), 編輯資訊
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最近為了這個實驗做不出. 來很頭痛. 想不出來原因. 只好來板上求各位前輩@@. --. 我的實驗是要從一隻基因轉殖的菌體中將其培養破碎後. 得其胞內酵素 進行轉化產生我要的產物. 目前大致上的培養流程如下. single colony. ↓ 30C, 24hr. 10mL flask. ↓ 30C
(還有474個字)
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