討論串[求救] 長片段ligation+primer desing
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推噓4(4推 0噓 9→)留言13則,0人參與, 最新作者monicatsen (monicatsen)時間15年前 (2010/12/10 22:28), 編輯資訊
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剛剛定序結果回來 我的PCR product是我要的target gene沒錯. 然後 使用的RE是fastdigest(Fermentas)的產品. 目前的策略是打算先做TA. 所以 想問一下 我下列的想法對嗎?. 因為實驗室的DNA polymerase都是有proofreading功能的enz
(還有52個字)

推噓4(4推 0噓 5→)留言9則,0人參與, 最新作者monicatsen (monicatsen)時間15年前 (2010/12/09 23:45), 編輯資訊
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最近在做長片段的ligation. insert片段為2.3k. vector 6.4k. 但一直接不起來 塗盤都沒長clone. insert及vector酵素切overnight. 接著做純化. ligation 現在用的條件是照ligase的protocol. I:V=3:1. 22度 ove
(還有402個字)
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