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討論串[求救] Cloning
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#3
Re: [求救] Cloning
推噓0(0推 0噓 0→)留言0則，0人參與, 最新作者licat (licat)時間9年前 (2015/11/26 00:19), 編輯資訊
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DNA濃度跟純度OK的話,切滿個2 hr就很夠了, 放久有些酵素還會亂切. insert兩端是blunt end? 是的話接不進去啊.... ligation可以作用久一點. 能用電穿孔的話, 效率會更高. 失敗是都沒長? 還是長很多vector only? 關係到你後續trouble shooti
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#2
[求救] Cloning
推噓1(1推 0噓 3→)留言4則，0人參與, 最新作者aaa111bb2 (Nate)時間9年前 (2015/11/26 00:03), 編輯資訊
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Cloning 相關問題. Vector為10K , RE 相距 9bp, 分別為 SNABI 及 NHEI (Sticky end and blunt end). NEB, smart buffer 取vector 1ug同時切兩刀 o/n. Insert 是chromosome PCR prod
(還有486個字)
#1
[求救] Cloning
推噓6(6推 0噓 20→)留言26則，0人參與, 最新作者alicialai (Fairy Monster)時間14年前 (2011/04/18 07:35), 編輯資訊
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Hello, 大家早, 最近face到很annoy的問題,. 我想了半天都想不出辦法來, 請大家幫忙解惑... 實驗步驟大致上是這樣,. 因為我的final construct have to be in pDM4 vector (7kb). 但是因為這傢伙很胖+copy number低,. 所以我
(還有513個字)
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