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討論串[求救] gel extraction
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#1
[求救] gel extraction
推噓17(17推 0噓 82→)留言99則，0人參與, 最新作者a14743535 (pig)時間11年前 (2013/03/19 19:55), 編輯資訊
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各位大哥大姊好阿. 我最近在做clone的實驗. 已經將insert(900bp)成功接進yT&A當中. 現在要大量培養. 用兩個限制酶將insert切下再接入另外一個vector中. 我取約1ug的plasmid進行RE digest(總反應體積20uL). 37度，2hr；70度水浴，10min
(還有389個字)
#2
[求救] gel extraction
推噓2(2推 0噓 0→)留言2則，0人參與, 最新作者TWX5566183 (塵世中一個迷途小五六)時間11年前 (2013/07/26 14:22), 編輯資訊
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收完前一天用enzyme切的vector之後拿去跑膠 band非常亮. (約8k多). 接著再把膠切下來拿去做gel extraction. 收完之後取dna跑膠發現band不見了. 想問問其可能的原因為何...謝謝. --. ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc). ◆ From: 140.1
#3
Re: [求救] gel extraction
推噓5(5推 0噓 28→)留言33則，0人參與, 最新作者puec2 ( .＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿.)時間11年前 (2013/07/26 16:54), 編輯資訊
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又一個受害者 先拍拍. 這個主要的原因有兩點 也可以說一點. 1. 你用的RE在gel extraction buffer裡面會degrade你的DNA.. 2. 你切的gel比較大塊 在gel extraction buffer裡面溶比較久. (或者你跑去戰酸民 :p)所以degrade得很徹底.
(還有207個字)
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