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討論串[求救] stable transfect的螢光表現
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[求救] stable transfect的螢光表現
推噓2(2推 0噓 6→)留言8則，0人參與, 8月前最新作者belzy (zy)時間10月前 (2024/01/03 15:33), 編輯資訊
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Transfect新手研究生. 要做overexpressed stable cell line，Insert 後面接紅色螢光當標記（有IRES也有直接做fusion的組別). 之前有先測試g418的濃度（800ug/ml). 現在遇到的問題是，在篩選之後有一些不會表達螢光的細胞長得很好，跟有螢光的
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#2
Re: [求救] stable transfect的螢光表現
推噓0(0推 0噓 3→)留言3則，0人參與, 10月前最新作者maurice9325 (水色天秤)時間10月前 (2024/01/05 09:16), 編輯資訊
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因為話多一點，所以回覆一篇討論。. 首先先談我的經驗與方法。我的經驗是還是要從single colony 去挑出stable clone容易很多。細胞適應抗生素活下來變成抗藥性細胞真的沒那麼難，且不帶過量表現蛋白往往長得比會表現過量蛋白來得好與快，幾次繼代後就沒有了，所以容易挑出只有抗藥性的細胞。.
(還有629個字)
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