[求救] stable transfect的螢光表現
Transfect新手研究生
要做overexpressed stable cell line，Insert 後面接紅色螢光當標記（有IRES也有直接
做fusion的組別)
之前有先測試g418的濃度（800ug/ml)
現在遇到的問題是，在篩選之後有一些不會表達螢光的細胞長得很好，跟有螢光的混在一起
分不開，是因為我一開始篩選的時候細胞不夠散嗎？
分盤之後再篩，沒有螢光的依然長得很好，已經會長得很均勻而不是團塊的樣子，還是沒辦
法只把有螢光的細胞分出來
想請問那些沒有螢光卻活下來的細胞，是螢光的promoter沒有被推動但是g418的promoter有
，還是篩出了有抗藥性的細胞？？還是其他原因？
還想請問我現在這個狀況有什麼補救的方法嗎？
感謝各位前輩們
在stable cell line卡好久卡到想休學了…orz
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