[問題] 關於RAW264.7細胞暴露問題

看板Medicine (醫學生物)作者 (其實我要的很簡單)時間16年前 (2009/03/24 15:25), 編輯推噓4(401)
留言5則, 4人參與, 最新討論串1/1
我想請教各位關於細胞暴露的問題, 我的實驗是將微粒暴露到RAW264.7細胞, 然後用ELISA kit測TNF-a, 但問題是control組(暴露PBS)的TNF-a釋放量一直都很高(800 pg/ml以上), 我試過很多條件都沒辦法解決... 包括seeding的細胞數和時間, 也換過細胞株,換過medium配方, ELISA standard curve沒問題, 現在細胞看起來是圓圓亮亮的, 我已經想不到可能出現問題的地方了, 想請教有類似經驗的各位幫我想想 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.116.94.75

03/25 22:38, , 1F
RAW是很敏感的細胞,血清用的是endotoxin-free的嗎?
03/25 22:38, 1F

03/25 22:40, , 2F
不是的話就可能是血清造成的囉
03/25 22:40, 2F

03/28 01:41, , 3F
不要用抗生素 確認是否有汙染 包括mycoplasm
03/28 01:41, 3F

04/10 12:55, , 4F
重新養一批新的 此外你的器具很容易有LPS之類污染的問題
04/10 12:55, 4F

04/30 23:12, , 5F
control要用PBS嗎?不能用medium?生長環境變~會刺激分泌
04/30 23:12, 5F
文章代碼(AID): #19o8hE5G (Medicine)
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