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[問題] 使用LC/MS或GC/MS測量小分子量蛋白質濃度

看板PhD (博士班)作者 (羽人非獍)時間7年前 (2018/05/20 19:29), 編輯推噓1(1推 0噓 6→)
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如果有一個目標蛋白序列已知，由68個胺基酸組成，無任何後轉譯修飾 在約40%左右粗萃蛋白質樣品中約含0.1%~1% 如果要測量目標蛋白質在粗萃樣品中的濃度，大家會推薦使用LC/MS或GC/MS呢? 需要事先取得該目標蛋白的標準品嗎? 或不用標準品也能測? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 111.83.176.70 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/PhD/M.1526815798.A.9FD.html
推
05/20 20:01, 7年前 , 1F
要先預測trypsin digestion完在LCMS最abundant的pept
05/20 20:01, 1F
→
05/20 20:01, 7年前 , 2F
ide一兩個 然後買合成的peptide standard做定量
05/20 20:01, 2F
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05/21 00:50, 7年前 , 3F
68個胺基酸很難氣化吧 無法氣化的東西是無法GC的
05/21 00:50, 3F
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05/21 05:55, 7年前 , 4F
68個胺基酸標準品會很難合成嗎?
05/21 05:55, 4F
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05/30 19:33, 7年前 , 5F
你定量就樣先把標準品tune好
05/30 19:33, 5F
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05/30 19:34, 7年前 , 6F
然後在基質環境下去拉標曲線
05/30 19:34, 6F
→
05/30 19:34, 7年前 , 7F
不然就要同位素或其他方法
05/30 19:34, 7F
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