[問題] transfection的步驟討論
【問題】：使用liposome進行transfection效率很低
【問題起因】：在NIH3T3進行transfection，結果幾乎沒有表現
【個人看法】：不知道是否為操作方法的問題，請各位給個意見。
首先，將細胞plate在3 cm dish，約等三十分鐘後，細胞已經附著，隨即進行transfection。
先取40ul沒有抗生素之medium，加入10ul之liposome(我用的是探索科技的expression in)
。用手指輕彈混和。再取48ul無抗生素之medium，加入2ug plasmid DNA，同樣以手指輕彈
混和。隨即將兩者加入同一管，同樣以手指輕彈混和，室溫下靜置二十分鐘。
已經附著的細胞，以無抗生素、無血清之medium清洗一次，再加入相同medium 1ml，之後
加入已混和好的liposome/plasmid complex，搖晃均勻。於incubator六個小時，再換有
血清之medium。
結果好像幾乎沒送進去。我使用pEGFP-N1，只要有送進去，細胞就發綠光。
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※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 122.123.138.160
推
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