[問題] Fibroblast isolat

看板Biology (生物學)作者 (腐出肩)時間8年前 (2016/12/18 23:17), 8年前編輯推噓0(008)
留言8則, 4人參與, 最新討論串1/1
【問題】: 初代培養纖維母細胞 【問題起因】:我們老闆要我試著使用大鼠或倉鼠的皮取出纖維母細胞, 我的做法是先把整塊皮取下,之後泡0.2% Dispase 一天,然後將真皮層用刀片括下, 再把真皮泡在0.1%的Collagenes type 4 一天,之後用細胞分離篩將消化液過篩, 加入無血清DMEM,離心,用DMEM 將 pellet打散,然後將細胞液培養。 現在做了三次都是底部看的到細胞,但是都是圓的,完全沒有展開。 請問有大大能幫忙隔空抓藥是哪邊有問題嗎? 或是有其他黃金Protocal可以幫忙嗎? 快要拿人頭去見老闆了 謝謝 -- 公主病是因為好男人誕生出來的,壞男人是因為公主病進化出來的。 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc), 來自: 27.105.164.17 ※ 文章網址: https://www.ptt.cc/bbs/Biology/M.1482074230.A.63D.html

12/18 23:36, , 1F
泡兩天感覺細胞都死光了
12/18 23:36, 1F

12/19 01:35, , 2F
coating?
12/19 01:35, 2F
※ 編輯: s0086 (27.105.164.17), 12/19/2016 02:12:29

12/19 02:13, , 3F
這個做法是用之前在教學醫院取人體簡體使用的,而且幾乎沒
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12/19 02:14, , 4F
都可以養的成功。
12/19 02:14, 4F

01/05 13:41, , 5F
以前是用十幾天的數胚在滅菌過的銅網上面磨然後洗下來
01/05 13:41, 5F

01/05 14:09, , 6F
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01/05 14:11, , 7F
只是以前第三步不是用針筒吸吹而是把除去內臟的鼠胚
01/05 14:11, 7F

01/05 14:12, , 8F
放在銅網上面"均質化"
01/05 14:12, 8F
文章代碼(AID): #1OLgXsOz (Biology)
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