Re: [問題] 請問EAS

看板Biotech (生命科學)作者enisx (Tuor Oronar)時間20年前 (2004/10/26 19:26)推噓2(2推 0噓 1→)

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※ 引述《lovesb (等待在十字路口Ｉ》之銘言： : 最近看paper看到一個以flow的原理為基礎的實驗方法 : EAS: Enzymatic amprification staining : 可用來amprifyㄧ些表現量低的分子的訊號以利我們detect : 但是看了paer中的內文 : 他們是在Ab上接上biotin,再用conjugate PE的streptavidin : 但是我不太明白這樣的過程中是在哪個步驟可以放大訊息呢^^? : 我找了當初提出這個方法的original paper : Cytometry 40:81–85 (2000) : 有看卻一整個沒有懂阿@@~ : 不知道有沒有了解這個實驗方法的大大可以解惑呢 : 謝謝呢^^ 這篇文章在MATERIALS AND METHODS的部分有提及他將實驗分成兩組一開始將細胞利用biotinylated的單株抗體去辨認接著分成 1.以傳統的方式用streptavidin conjugated FITC 或PE (orCY3) （因biotin和streptavidin有很強之結合力) 接著作FACS 2.利用TAS (Tyramide Signal Amplification)的原理您可參考:http://www.blossombio.com.tw/Products/TSA.html or http://www.blossombio.com.tw/PDF/Products/TSA%20Priciple.pdf 這同樣是運用biotin和streptavidin之間的結合力,而streptavidin又能再和另三個biotin結合，此三個biotin另外各自接上酵素(HRP) 經TAS放大後再用streptavidin conjugated FITC 或PE (orCY3) 可以得到較好的結果!! 這篇paper是在證明後者比前者好 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 140.112.25.191