Re: [問題] 請問有關western blotting的transfer問題

看板Biotech (生命科學)作者 (^^)時間19年前 (2006/04/02 12:50), 編輯推噓1(102)
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※ 引述《albertwang (會思考的魚)》之銘言: : ※ 引述《ghjkl (黃寶臻黃寶臻黃寶臻)》之銘言: : : 各位先進大家好 : : 小弟目前再進行western blotting的實驗 : : 由於希望能同時觀察100多Kd和30多Kd的蛋白 : : 所以在transfer時會把時間拉長 : : 但最近有各疑問就是 : : 我這樣的加長時間會不會造成較小的蛋白穿過PVDF而跑掉呢 : 30那一個機會滿大的 : 不過你用nc membrames : 你的問題就不見啦 : : 在我看的一些protocol的網站中 : : 好像都沒有看到這一類的說明 : : 不知道有沒有人可以解說一下呢 蛋白質的SIZE是多大阿 這種基本的問題我都查不到 我做的是Bcl-2 Bax caspase 3,cytochrome c. 我是用semi-dry的方法只用300mA 相當於4~5V而己 TRANSFER後的GEL 染Coomasie blue 還是很藍很藍 但我用濕式 效率就很好 但雜bend很多 我用40microgram transfer久一點或電流調高 蛋白會不會穿透呢 我的prestain marker 72kDa的會到濾紙上耶 -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.62.195.21

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一般來說,應該是不會啦!但,我不知道有無例外
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04/02 13:20, , 2F
Protein size的查閱,一般應該是從NCBI上會是比較快
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04/02 13:21, , 3F
的方法。
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文章代碼(AID): #14BrWlxO (Biotech)
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