[方法] linker

看板Biotech (生命科學)作者 (大大凱)時間19年前 (2006/04/21 22:35), 編輯推噓2(200)
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請教一下各位大大有人用過這種方法嗎 我解釋一下用法 首先因為只要接76bp所以設計兩條類似primer的東西 不過他的長度為76bp加上Xho I的長度示意圖如下 Xho I C^TCGAG所以我們這樣設計 TCGAG.................................C C.................................GAGCT 分別合成上股跟下股然後先將兩股各取大概1ug放在一起水加到20ul 加溫到95度5min 後用大量的衣服包起來使其溫度緩慢的下降 約降至室溫時就可以做ligation了 我所說的就是這個方法請問有人用過還有什麼注意事項嗎???? ligation成功率又如何呢??? -- ※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc) ◆ From: 61.31.135.203

04/21 22:53, , 1F
要用PNK把尾巴磷酸化才接的起來
04/21 22:53, 1F

04/22 01:35, , 2F
或者既然用買的,就直接訂5'phospho modified的primer
04/22 01:35, 2F
文章代碼(AID): #14IEsvBx (Biotech)
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