Re: [問題] 請問SPR有人用過嗎?
※ 引述《a64toto (我)》之銘言：
: 就是奇異安瑪西雅公司那台Biocare啦
: 不知道有人使用過嗎
: 聽說它可以取代傳統的ELISA方法測抗原與抗體之間的結合常數
: 我想請問一下有沒有protein size的限制
: 使用的chip是要將抗原coat在上面還是抗體呢?
我用過Biacore 試蛋白與好幾個小分子的binding, 最後失敗了 >.<
隨便找了幾篇相關paper, 不知道是不是有代表性的實驗
只知道 抗原和抗體 都有人試過coat 在chip 上
根據
http://www.ehscenter.org/facility/pipfc_spr.html
以及其他幾個我查到的網頁
1. 分子的size 沒有特別的限制
2. 通常小的分子immobolized 在chip 上, 大的分子in solution flow through
這樣的好處是 有binding 時, signal 會顯得比較強,
我猜是因為 chip surface 大小是固定的, 太大的分子在chip 上的話,
可能會造成RU 數量低
我個人覺得 還是完全要看你的抗原& 抗體為何, 有多適合immobolization
另外 看你的實驗是要看什麼, 只是一種抗原 一種抗體, or 多種抗體,
比較誰比較利害?
chip很貴 要建立一個合適的系統需要時間 ( & 運氣?)
以下資訊看起來挺不錯的 請參考看看 (sorry, 老人不懂縮網址)
http://www.cgr.harvard.edu/resources/Instrumentation/
Biacore%203000%20Beginners%20Checklist.doc
Good luck
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